RIPA 组织 / 细胞裂解液（中）WB-0071

产品名称：RIPA 组织 / 细胞裂解液（中）
产品型号：WB-0071
产品产地：中国大陆
采购热度：1985
发布时间：2015/7/13 15:36:44
简介内容：RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
注意事项： 1．为获得*佳的实验效果，可适当分装使用，以尽量避免反复冻融。
2．PMSF应现用现加。
3．裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
4．蛋白酶抑制剂均有较高的毒性，为

详细内容/Content

RIPA 组织 / 细胞裂解液（中）

品名编号规格原价格

RIPA裂解液 WB-0071 50ml 80

使用说明：

1．培养细胞
取出裂解液，待融化后颠倒混匀数次，适量分装冻存。在使用前取出PMSF(100mM)，按比例加入（使其*终浓度为1mM）混匀，立即使用。

贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有干扰，也可以不洗)。按6孔板每孔加入100-200微升的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞数秒后细胞就会被裂解。

悬浮细胞：收集培养细胞，离心去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有干扰，也可以不洗)，用手指把细胞用力弹散，按6孔板每孔细胞加入100-200微升的比例加入裂解液。如果细胞数量较大，应按50-100万细胞/管分装或根据细胞数量按比例增加裂解液。用手指轻弹管底以促进裂解液和细胞充分接触，裂解完全时应无明显的细胞颗粒。

裂解物经10,000-14,000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。

2．组织样品
取Ep管，分别称重标记，把组织剪切成小块装入Ep管中，称重。按每20毫克组织加100-200微升的比例加入裂解液(如裂解不完全，可以适当增加用量；如需要的蛋白样品浓度较高，可以适当减少用量)。用手握式电动组织细胞匀浆器匀浆约1分钟或直至充分裂解。10,000-14,000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

如果组织样品本身非常细小，如淋巴细胞，可直接加入裂解液，通过振荡（Vortex）以使样品裂解完全。

保存条件：
PMSF需－20℃保存，裂解液若经常使用，可于4℃保存至少三个月。若长期保存，建议置于－20℃。

注意事项：
1．为获得*佳的实验效果，可适当分装使用，以尽量避免反复冻融。
2．PMSF应现用现加。
3．裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
4．蛋白酶抑制剂均有较高的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。一旦直接接触，请立即用流水冲洗，再向医疗保健结构咨询。

包装清单：

RIPA裂解液	50ml（－20℃保存）
PMSF（100X）	550ul（－20℃保存）
使用说明书	1份

更多详情

更新时间：2024/5/8 9:06:33

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